pda培养基如何配置_PDA培养基的配制方法 环球观点

1、PDA培养基的配方土豆 200g葡萄糖【táng】 20g琼脂 15～20g水【shuǐ】 1000mLpH值 自然【rán】PDA培养基的配【pèi】制称量【liàng】和【hé】熬煮 按培养基配方逐一称取去皮土豆。

2、土豆切【qiē】成小【xiǎo】块放入锅【guō】中，加水1000ml，在加热【rè】器上加【jiā】热至沸腾，维持20-30min，用可用2层纱【shā】布趁热在量杯上过【guò】滤，滤渣弃【qì】取。

3、滤液补充水分到1000ml。

(资料图)

4、加热【rè】溶解 把【bǎ】滤【lǜ】液放入锅中【zhōng】，加入葡萄糖20g，琼脂【zhī】15～20g(提前搞碎)，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻【bō】棒不断搅拌，以防琼脂糊底【dǐ】或【huò】溢出【chū】，待琼脂完全【quán】溶【róng】解后【hòu】，再【zài】补充水分至所需量。

5、分装 按实【shí】训【xùn】要求，将配制【zhì】的培养基分装入试管或500ml三角【jiǎo】瓶内【nèi】。

6、分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。

7、分装量：固体培【péi】养基【jī】约为试管【guǎn】高度的1/5，灭菌后制成斜面，分装【zhuāng】入三角瓶【píng】内以不超过其容积的一【yī】半为宜;半固体培养【yǎng】基以【yǐ】试管高度【dù】的1/3为宜【yí】，灭菌后垂直待凝。

8、加棉塞 培养基分装完毕【bì】后，在试管口或三【sān】角烧瓶【píng】口上塞上棉【mián】塞(或【huò】泡【pào】沫塑【sù】料塞或试管【guǎn】帽等)，以阻止外【wài】界微生物进入培养基【jī】内造成污染，并【bìng】保证有良好的通气性能。

9、包扎 加塞【sāi】后，将全部试管用【yòng】麻绳或橡皮【pí】筋捆好【hǎo】，再在【zài】棉塞外【wài】包一层牛【niú】皮【pí】纸，以防【fáng】止灭菌时冷【lěng】凝水润湿棉塞，其外再用【yòng】一道线绳或橡皮筋扎好，用记号笔注明培【péi】养基名称、组别、配制日期【qī】。

10、棉塞制作说明棉塞【sāi】的作用【yòng】：一是防止杂菌污染;二【èr】是【shì】可【kě】过【guò】滤空气【qì】，保证通气良好，并【bìng】可【kě】减缓培【péi】养基水分的蒸发，所以正确地制【zhì】备棉【mián】塞是培养基制备中【zhōng】重要的一环。

11、正确的【de】棉塞是形【xíng】状【zhuàng】、大小，松紧应与试管口(或三角【jiǎo】烧瓶【píng】)完全【quán】适合。

12、过紧则妨碍空气流【liú】通，操作不便;过【guò】松【sōng】时，空气会毫无障【zhàng】碍【ài】地进【jìn】入试管【guǎn】(或三角烧瓶)中，达不到灭菌的【de】目的。

13、棉【mián】塞过小往往【wǎng】易掉进试管内，因此棉【mián】塞质量的优劣对实训的【de】结果【guǒ】有很大【dà】的影响。

14、正【zhèng】确的棉塞头较大【dà】，加塞时，应使棉塞长【zhǎng】度的1/3留【liú】在试【shì】管口外，2/3在试管口内。

15、目前，有【yǒu】条件的【de】实训室【shì】已使【shǐ】用【yòng】坚固的塑料试管帽、金属试管帽【mào】、硅胶泡沫塞替代棉塞，制作棉塞要【yào】选纤维较长的棉花，一般【bān】不【bú】选【xuǎn】用脱【tuō】脂棉。

16、因为它容易吸水变湿，造成污染，而且价格也贵。

17、PDA培养基配制【zhì】注【zhù】意【yì】事项培养基经【jīng】灭菌后，必须放【fàng】在37C温【wēn】箱培养24h，无【wú】菌生长者方可使用。

18、PDA培养基一般不需要调pH。

19、对于要调节pH的培养基，一般用pH试纸测定其pH。

20、如果培养基【jī】偏酸或【huò】偏碱【jiǎn】时，可【kě】用【yòng】lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。

21、调节时应【yīng】逐滴【dī】加入NaOH或HCl溶液，防止局部过酸【suān】或【huò】过碱破坏培养基成分。

22、培养【yǎng】基在使用时也【yě】可以做成不含琼【qióng】脂【zhī】的液体培【péi】养【yǎng】基，用于菌类的震【zhèn】荡培养。

23、培养基【jī】也可以【yǐ】加入氯霉素或土霉【méi】素，加入量为0.2g/L培养【yǎng】基，主要是【shì】为了抑制【zhì】细菌的生长【zhǎng】，减少干扰性。

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