发展更精准高效的诊断技术

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本报记者 段梦【mèng】兰结核病的检测诊断技术不断【duàn】发【fā】展。随着分子生物学突飞【fēi】猛进，多种非【fēi】痰【tán】液诊断技术【shù】、高通量测序技术【shù】、核酸质谱检【jiǎn】测【cè】技术等【děng】补充了传统【tǒng】细【xì】菌学检测与诊断方法【fǎ】，检测【cè】标本也【yě】从痰液标本扩展到非痰液标本【běn】。

更加高效、准【zhǔn】确的诊断【duàn】技术，是终止结核【hé】病【bìng】流行的必【bì】要条件之【zhī】一。在近期召开的2023年【nián】全国结核病学术大会上，众【zhòng】多专家学【xué】者就结【jié】核【hé】病检测、诊断等领域的技术【shù】发展与突破进行了交流。

更快找到结核杆菌深呼【hū】吸，低头，弯腰，用力咳【ké】嗽……长期以【yǐ】来，留痰【tán】获【huò】取痰【tán】液标本进行检【jiǎn】测是【shì】临床诊断结【jié】核病的“金标【biāo】准【zhǔn】”。1882年，德【dé】国科学家【jiā】罗伯特·科【kē】赫首次【cì】发现并证明了结核分枝杆菌是结核病的病原菌。此后，痰【tán】涂片镜检技术成为沿用至【zhì】今【jīn】的结核病【bìng】诊断方法。

据了解，目前【qián】结核【hé】病【bìng】的检测诊断有细菌学、分【fèn】子【zǐ】生物学、免【miǎn】疫学等几条路径，临【lín】床上也通过X线检查进行影像【xiàng】学【xué】诊断。

“传【chuán】统的细菌学诊断方【fāng】法包括痰涂片镜检【jiǎn】和痰【tán】结核菌培养等，但临床【chuáng】上看痰【tán】涂片敏感度【dù】较【jiào】低，痰结核菌培养耗时较长【zhǎng】，严重影响了结【jié】核病的【de】早【zǎo】期精准高效诊断。”山东【dōng】大学附属公共卫生临床中【zhōng】心结核科丁【dīng】彩红【hóng】副主任医师说，在痰液标本【běn】检测【cè】中，当患者无痰或无法提【tí】供【gòng】高质【zhì】量痰液时，可能无法获取准确的诊断结【jié】果。

丁彩红表示，近【jìn】年来，一批如GeneXpertMTB/RIF等用于结【jié】核【hé】病早期诊断的【de】快速诊【zhěn】断技术【shù】大大提【tí】高了诊断准确【què】性，缩短了诊断时间【jiān】。但在痰液【yè】稀少或无痰结核【hé】患【huàn】者中，此类【lèi】检测技术的灵敏度也【yě】会打折扣。

具有高灵敏度和特异【yì】度的分【fèn】子生物学检测诊【zhěn】断技【jì】术为患者早期诊断及精准治疗【liáo】提供了【le】依【yī】据，目前被迅速推广，属于【yú】热门研究领域。首都医科【kē】大【dà】学【xué】附【fù】属北【běi】京【jīng】胸科医【yī】院结【jié】核一【yī】科副主任聂文【wén】娟说，将分子生物【wù】学检测诊断【duàn】技术应用于病原学诊断，可以实现更高【gāo】效、精准的检测。

“比如，通过分子【zǐ】生【shēng】物学技术检测患【huàn】者的体【tǐ】液标本，找到【dào】包括结核分枝杆菌【jun1】在内的病原【yuán】微生物基因，以此诊【zhěn】断疾病。”聂【niè】文娟介【jiè】绍，传【chuán】统痰结核菌培【péi】养需要花费近1个月时【shí】间，而分子【zǐ】生【shēng】物学技术可以【yǐ】在1天内实现诊断。这意味着，找到结核分枝杆菌变得更快、更准。

多条路径指向共同目标【biāo】“我们向着终结【jié】结核病流行的【de】共同目标努力。”会上，众多专【zhuān】家学者就近期结核病检测、诊【zhěn】断【duàn】技【jì】术的探【tàn】索与【yǔ】发现进行了分【fèn】享。

“我们近期的研究【jiū】验【yàn】证了【le】纳【nà】米【mǐ】孔测序技术用于疑似肺结核患者支【zhī】气管肺【fèi】泡灌洗液样【yàng】本【běn】的诊断【duàn】价值【zhí】。”聂文娟介绍，该研究对【duì】现有【yǒu】分子生物学技术进行了优化【huà】，运【yùn】用高通量的纳米孔测【cè】序技术【shù】，实现同时检测多种基因片段，短时间内获取【qǔ】样本【běn】中【zhōng】微【wēi】生物的生物学信息【xī】，同【tóng】时检测其基因序列是否发生耐药【yào】基因突变。

“我们不仅能够高【gāo】效找到结核分枝杆菌，还【hái】能【néng】同【tóng】步判断找【zhǎo】到的细【xì】菌是‘敏感’还是‘耐药【yào】’，一举多得。”聂文娟【juān】说。

“在临床中，细菌学检测【cè】为阴性的【de】肺结核患者占【zhàn】有一【yī】定比【bǐ】例【lì】，存在一【yī】定【dìng】的误诊和漏诊。”丁彩红【hóng】及团队成员利用核酸【suān】质谱检测技术【shù】对痰液及【jí】支气管肺【fèi】泡灌洗液样本检测发现，该技术有【yǒu】利于提高痰液含菌【jun1】量较【jiào】低的肺结核患【huàn】者的早【zǎo】期诊断【duàn】率，可快速检测结【jié】核分枝杆菌，并同【tóng】时检测【cè】是否存在【zài】耐药情况。

新型高性能非痰液【yè】诊断技术不断发展【zhǎn】，覆盖更多【duō】无痰【tán】或少痰患者。“基于新兴的CRISPR检测技术【shù】，我们【men】追踪了血【xuè】液标本中【zhōng】结核分枝杆菌【jun1】的无【wú】细胞DNA，为快速【sù】诊断结【jié】核【hé】病【bìng】并监测药物治疗是否有效提【tí】供了依据。”深【shēn】圳国家感染性疾【jí】病临床医学研究中【zhōng】心特【tè】聘副研究员黄震介绍【shào】，该技术尤【yóu】其【qí】在细菌【jun1】学检测方法未检测到或细【xì】菌较少的肺【fèi】结核病例的早期诊断中，具有潜在价【jià】值。

将【jiāng】人工智能运【yùn】用到结【jié】核病诊【zhěn】断领域也是当前热点之一。“在影像学诊【zhěn】断【duàn】领域中，医生【shēng】读片子耗【hào】时【shí】耗力，尤【yóu】其【qí】是【shì】在基【jī】层【céng】面临【lín】大量影【yǐng】像学内容时，效率较低，准确率也容易受到影响。”黄震说，不【bú】少研究者将人工智能辅【fǔ】助【zhù】医生判读【dú】运用到CT检查中，这对于结核病的大规模筛查、快速诊断有重【chóng】要【yào】意义。

推【tuī】动更广泛【fàn】运用新技术“在研究者不【bú】断探索更加【jiā】高效【xiào】、精准【zhǔn】的检测诊断方法的【de】同时，疑似肺结核患【huàn】者依旧【jiù】应【yīng】该【gāi】尽量【liàng】通过痰【tán】液标【biāo】本进行筛查【chá】。细【xì】菌学诊断【duàn】方法仍是结核病诊断【duàn】的‘金标准’。”丁彩红表示，在条件允许的情况下，如果仅【jǐn】通过痰【tán】液标本检测就能诊断【duàn】肺结核【hé】并尽早开【kāi】始治疗，无疑是好事【shì】。但痰中检测不到结【jié】核分枝杆菌并不意味【wèi】着不是肺【fèi】结核，需要【yào】更【gèng】进一步的精【jīng】准检测。

“尽管许多技【jì】术【shù】和研究仍处于早期开发或试验阶段【duàn】，但近【jìn】年来我们【men】的诊断【duàn】能力一直在加【jiā】强【qiáng】，可用的高效、精准【zhǔn】诊断技术和工具越【yuè】来越多。”黄震【zhèn】介绍【shào】，在分子【zǐ】生物学技术领域【yù】，诊断能力的【de】加强首【shǒu】先【xiān】体【tǐ】现在标本扩展上。检【jiǎn】测标本从痰液标本逐【zhú】渐拓展【zhǎn】到非痰【tán】液标本，包括血液【yè】、尿液、粪便、支气管肺泡灌【guàn】洗液等，为患者提供了更多便利。

“对于咳痰条件【jiàn】不【bú】允许、无【wú】法自己产生高质量痰液的人【rén】群，尤其是儿【ér】童、肺外结核患者、艾滋病患者等，基于非痰液标本的检测【cè】诊断技术飞【fēi】速发展【zhǎn】具有重要【yào】意义。”黄震说，通【tōng】过早期诊断、早【zǎo】期【qī】干【gàn】预、早期治【zhì】疗，能够【gòu】有效避免此类【lèi】人群患结核【hé】病【bìng】后的快速重症化。

结【jié】核病的早期确诊对于尽早治疗、减少疾【jí】病传【chuán】播至【zhì】关【guān】重要【yào】，但目前结核病发现率和【hé】报告率【lǜ】仍有待进【jìn】一步提高。“我【wǒ】们【men】要采取主动【dòng】发【fā】现策略，对部分人群进【jìn】行筛查检【jiǎn】测。”首【shǒu】都医科大学附【fù】属【shǔ】北京【jīng】胸科医院细菌免【miǎn】疫室主【zhǔ】任逄宇介绍道，在诊断技术方面，需进一步【bù】开发具有更高敏感【gǎn】度和特异性的即时便携式检测方法【fǎ】和手段。

研究者们对【duì】舌拭【shì】子、深喉检测等便携【xié】式或自采【cǎi】样标【biāo】本【běn】检测技术也进行了初步探索。“我们此前进行了【le】有关舌拭子和深喉检测【cè】的研【yán】究，不少研【yán】究证【zhèng】明此类方法是有准确性和适用性【xìng】的。”逄宇说，通过规范【fàn】流程采【cǎi】集到的样本【běn】，可【kě】以【yǐ】作为一种较为可【kě】靠的痰液标本【běn】替代【dài】类型，在更精准优化采【cǎi】样流程、提高检测效能的【de】未来，可助力大【dà】规模人群筛查【chá】。

从【cóng】目前来看，一【yī】些较为前沿【yán】的【de】检测技术流程已经【jīng】比较成熟。逄宇强调，新技术在临床应【yīng】用方【fāng】面【miàn】需【xū】要进【jìn】一步规范【fàn】和优化，通过多方配【pèi】合，推动更多医疗【liáo】机构运用【yòng】新技术，惠及更多人。

2014年，世界卫生组织提出“终止【zhǐ】结核病战略【luè】”，并【bìng】提出了2035年目标：与2015年相【xiàng】比【bǐ】，结核病发【fā】病【bìng】率减【jiǎn】少90%，死亡数减少95%，结核病的发病率【lǜ】降【jiàng】至10/10万以下。“要实现‘终止结【jié】核病战略’的目标，我们需【xū】进一【yī】步努力【lì】。”黄震说【shuō】，探索更多的有效检测诊断技术，让更多【duō】潜伏性【xìng】结核【hé】感染者得到干预，让更【gèng】多结核【hé】病【bìng】患者得到有效治疗，还有【yǒu】很多【duō】路要走。